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线粒ä½?/span>作为细胞的能é‡å·¥åŽ‚åœ¨å¤šä¸ªä¿¡å·é€šè·¯ä»¥åŠå¤šç§ç–¾ç—…çš„å‘生å‘展䏿‰®æ¼”了相当é‡è¦çš„角色ã€?/span>对线粒体蛋白质组进行多维度的解æžèƒ½å¤Ÿä½¿æˆ‘ä»?/span>æ›´æ·±å…¥åœ°äº†è§£å®ƒçš„åŠŸèƒ½ã€‚ç„¶è€Œï¼ŒçŽ°æœ‰çš„çº¿ç²’ä½“è›‹ç™½è´¨ç»„å¦æŠ€æœ¯å˜åœ¨ç›¸åº”的缺陷。其ä¸ï¼Œé€šè¿‡å¯†åº¦æ¢¯åº¦ç¦»å¿ƒå¾—到的线粒体容易被其ä»?/span>细胞å™?/span>污染,且对分离åŽçš„线粒体进行蛋白质组å¦åˆ†æžä¸èƒ½å¤Ÿåæ˜ æ´»ç»†èƒžå†…çš„çœŸå®žæƒ…å†µã€‚é…¶ä¿?/span>é‚»è¿‘æ ‡è®°ä»¥åŠäºšç»†èƒ?/span>定ä½çš„æ´»æ€?/span>化å¦åˆ†åæ ‡è®°æŠ€æœ¯å¸¸ç”¨äºŽæ´»ç»†èƒžä¸çš„线粒体蛋白质组å¦åˆ†æžï¼Œç„¶è€Œè¿™ä¸¤ç§æŠ€æœ?/span>分别å—é™äºŽè´¨ç²’转染的æ“ä½œéš¾åº¦ä»¥åŠæ´»æ€?/span>化å¦åˆ†åçš?/span>éžç‰¹å¼‚æ€§æ ‡è®?/span>ã€?/span>
å›?/span>1. CAT-Prox技æœ?/span>示æ„å›?/span>
近日,北京大å¦åŒ–å¦ä¸Žåˆ†å工程å¦é™¢é™ˆé¹/樊新元团队报é“了一ç§?/span>基于光催化的生物æ£äº¤å应çš?/span>新一ä»?/span>çº¿ç²’ä½“è›‹ç™½è´¨ç»„å¦æŠ€æœ?/span>CAT-Proxï¼?/span>Photocatalytic decaging-enabled proximity labeling strategyï¼?/span>ã€‚è¯¥ç ”ç©¶åˆ©ç”¨å…‰å‚¬åŒ–çš„ç”Ÿç‰©æ£äº¤å应的独特优势,æå‡ºå…‰æ•剂é¶å‘线粒体和å¯è§å…‰å¤–æºæŽ§åˆ¶çš„â€œåŒ–å?/span>-光控â€ååŒç–略,在活细胞的线粒体ä¸åŽŸä½å‚¬åŒ–äº§ç”Ÿæ´»æ€§åŒ–å¦æŽ¢é’ˆï¼Œç”¨äºŽçº¿ç²’ä½“è›‹ç™½è´¨ç»„çš„åŽŸä½ã€å®žæ—¶æ ‡è®°ï¼Œå®žçŽ°äº†æ— éœ€åŸºå› æ“ä½œã€æ—¶ç©ºçµæ´»å¯æŽ§çš„çº¿ç²’ä½“è›‹ç™½è´¨çš„åŽŸä½æ ‡è®°ï¼Œåœ¨éš¾ä»¥åŸºå› æ“作的细胞ä¸å®žçŽ°äº†é«˜ç‰¹å¼‚çš„çº¿ç²’ä½“è›‹ç™½è´¨ç»„å¦çš„“时-空â€åˆ†æžã€?/span>
作者首先将å“应è“光照射çš?/span>光催化剂定ä½è‡³çº¿ç²’体,éšå?/span>å‘细胞ä¸åŠ å…¥å æ°®è‹¯åŸºä¿æŠ¤çš„亚甲基é†?/span>化åˆç‰?/span>。其ä¸ï¼Œå 氮苯基能够在è“光的照射下被光催化剂催化还原并离去,原ä½ç”Ÿæˆé«˜äº²ç”µæ€?/span>的亚甲基醌ä¸é—´ä½“ï¼Œå®žçŽ°çº¿ç²’ä½“è›‹ç™½è´¨çš„ç‰¹å¼‚æ€§æ ‡è®°ã€‚æœ€åŽï¼Œä½œè€…通过选择æ€?/span>富集和串è”质谱分æžè¢«ç‰¹å¼‚æ€§æ ‡è®°çš„çº¿ç²’ä½?/span>蛋白质,实现é«?/span>覆盖çŽ?/span>ã€é«˜ç‰¹å¼‚æ€§ä»¥åŠæ—¶ç©ºåˆ†è¾¨çš„线粒体蛋白质组å¦åˆ†æžã€‚结果表明,该方法在HeLaç»†èƒžä»¥åŠæ›´éš¾è½¬æŸ“çš?/span>RAW264.7细胞ä¸èƒ½å¤Ÿé‰´å®šåˆ°è¶…过200个线粒体蛋白质,特异性高è¾?/span>70%。æ¤å¤–,作者还利用这一ç–ç•¥åœ?/span>炎症刺激ä¸?/span>çš?/span>RAW264.7细胞ä¸?/span>实现了线粒体蛋白质组的动æ€åˆ†æžï¼Œé™¤äº†èƒ½å¤Ÿé«˜ç‰¹å¼‚性地鉴定线粒体蛋白质以外还能够对它们在炎症刺激å‰åŽçš?/span>丰度å˜åŒ–进行监测ï¼?/span>实现多维度的线粒体蛋白质组å¦åˆ†æžã€?/span>
å›?/span>2. 线粒体蛋白质组的串è”质谱分æžç»“æžœ
综上ï¼?/span>è¯¥é¡¹ç ”ç©¶å¼€å‘了基于光催化的生物æ£äº¤å‰ªåˆ‡å应以åŠé‚»è¿‘æ ‡è®°çš„çº¿ç²’ä½“è›‹ç™½è´¨ç»„å¦æŠ€æœ?/span>CAT-Prox。该技æœ?/span>在ä¸éœ€è¦è´¨ç²’转染的情况下实现了时空分辨的线粒体è›?/span>白质组å¦åˆ†æžï¼Œä¸ºæ—¥åŽåœ¨æ´»ä½“ä¸è¿›ä¸€æ¥ç ”究亚细胞区域的动æ€è›‹ç™½è´¨ç»„打下了åšå®žçš„基础,从而能够更深入更细致地对生物å¦è¿‡ç¨‹è¿›è¡Œè§£æžã€‚è¯¥ç ”ç©¶æˆæžœè¿‘æ—¥ä»?/span>â€?/span>Bioorthogonal Photocatalytic Decaging-Enabled Mitochondrial Proteomicsâ€ä¸ºé¢˜å‘表于Journal of the American Chemical Society (//doi.org/10.1021/jacs.1c09171)ã€?/span>
北京大å¦åŒ–å¦ä¸Žåˆ†å工程å¦é™¢åšå£«ç ”究生黄宗煜ã€åˆ˜åç¦ä¸ºè¯¥è®ºæ–‡çš„å…±åŒç¬¬ä¸€ä½œè€…,北京大å¦åŒ–å¦ä¸Žåˆ†å工程å¦é™¢ã€åŒ—å¤?/span>-清åŽç”Ÿå‘½ç§‘å¦è”åˆä¸å¿ƒé™ˆé¹æ•™æŽˆå’ŒåŒ—京大å¦åŒ–å¦ä¸Žåˆ†å工程å¦é™¢çš„æ¨Šæ–°å…ƒå‰¯ç ”究员为该论文的共åŒé€šè®¯ä½œè€…。该工作得到了国家自然科å¦åŸºé‡‘å§”ã€ç§‘技部ã€åŒ—京分åç§‘å¦å›½å®¶ç ”ç©¶ä¸å¿ƒä»¥åŠåŒ—å¤?/span>-清åŽç”Ÿå‘½ç§‘å¦è”åˆä¸å¿ƒçš„资助ã€?/span>
原文链接�/span>//pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.1c09171